Macromolécules
ITR propose une gamme complète d’essais in vitro et in vivo conformes aux BPL pour soutenir le développement de thérapies à base de macromolécules, incluant les protéines, les acides nucléiques, les thérapies géniques et les produits biologiques.
Notre expertise couvre les méthodes analytiques et bioanalytiques, l’immunologie, la biodistribution et l’immunotoxicologie, permettant une caractérisation, une quantification et une évaluation de la sécurité des biomédicaments à toutes les étapes du développement préclinique.
Types de tests conformes aux BPL offerts chez ITR:
- Protéines : Absorbance (UV280), colorimétrique (BCA, microBCA), fluorométrique (CBQCA)
- Acides nucléiques : Test Quant-it™ RiboGreen
- ELISA: Quantification par méthodes colorimétriques, luminescentes et fluorescentes
- ECLIA: Essais électrochimiluminescents (plateforme Meso Scale Discovery)
- PCR digitale (ddPCR) : Simple ou en multiplex (jusqu’à 6 cibles) pour déterminer la concentration de thérapies géniques dans le sang
- ELISA par hybridation: application de type ddPCR en format simple. Recommendé pour les acides nucléiques courts (par ex. ARNi)
- Distribution in vivo d’une variété de thérapies innovantes, y compris les thérapies géniques à base de vecteurs viraux, les immunothérapies cellulaires et les thérapies d’édition génique.
- Divers biomarqueurs endogènes tels que les hormones, cytokines ou composants tissulaires mesurés par ELISA (simple) ou ECLIA (Meso Scale Discovery, simple ou multiplex)
- Les tests simples sont validés conformément aux BPL
- Jusqu’à 10 biomarqueurs peuvent être multiplexés simultanément avec un volume d’échantillon minimal (≤ 10 µL).
- Tests colorimétriques, fluorescents ou en luminescence pour mesurer les activités enzymatiques.
- Méthode de cytométrie en flux conforme aux BPL utilisant une variété d’anticorps se liant ou non au biomédicament et à son récepteur cible sur différents types de cellules immunitaires.
Immunologie:
- Caractérisation des globules blancs par cytométrie en flux, incluant les monocytes, lymphocytes T, lymphocytes B, pDC, neutrophiles et macrophages. Prend en charge le phospho-flow et l’analyse ex vivo.
- Marquage d’immunophénotypage conformes aux BPL disponibles, avec des options complètes de personnalisation et de validation.
- Tests de viabilité, de prolifération et de migration cellulaires.
- Détection et titration des anticorps anti-médicament (ADA) à l’aide d’ELISA ou d’ECLIA
- Tests cellulaires pour la détection des anticorps neutralisants (NAb)
- Tests de titration des anticorps pour les programmes de vaccination en utilisant des méthodes ELISA ou ECLIA
- Tests de réponse anticorps dépendante des lymphocytes T (TDAR) pour la détection d’anticorps IgM et IgG spécifiques anti-KLH après l’administration de l’antigène Keyhole limpet haemocyanin (KLH).
- Les TDARs sont validés à la fois chez le rat et chez le singe.
Équipement:
L’ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) est une méthode sensible utilisée pour détecter et quantifier des protéines ou des anticorps spécifiques dans un échantillon, grâce à la liaison antigène-anticorps et à un signal enzymatique, le plus souvent grâce à une réaction chromogénique. Elle est largement utilisée en recherche et en diagnostique en raison de sa précision et de son adaptabilité.
- L’ECLIA (Electrochemiluminescence Immunoassay) est une technique très sensible qui utilise l’émission de lumière déclenchée électrochimiquement pour détecter et quantifier des biomolécules spécifiques, telles que des protéines ou des anticorps. Elle combine la liaison antigène-anticorps avec une détection électrochimiluminescente pour une mesure précise et fiable.
- La PCR digitale (ddPCR) est une méthode extrêmement précise de quantification des acides nucléiques, consistant à diviser un échantillon en milliers de gouttelettes et à effectuer une réaction de PCR individuellement dans chacune d’elles. Elle permet une quantification absolue sans avoir recours à des courbes standard, ce qui la rend idéale pour la détection de cibles en faible abondance.
- La cytométrie en flux est une technique puissante utilisée pour analyser les caractéristiques physiques et chimiques de cellules individuelles ou de particules lorsqu’elles passent devant un faisceau laser. Elle permet une analyse rapide et multiparamétrique des populations cellulaires, incluant la taille, la complexité et l’expression de marqueurs.